检测T4多聚核苷酸激酶去磷酸化活性的方法、试剂盒

基本信息

申请号 CN202011542000.6 申请日 -
公开(公告)号 CN114672539A 公开(公告)日 2022-06-28
申请公布号 CN114672539A 申请公布日 2022-06-28
分类号 C12Q1/48(2006.01)I;G01N30/02(2006.01)I;G01N30/34(2006.01)I;G01N30/86(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 魏喜换;娄双颜;赵瑞雪 申请(专利权)人 郑州思昆生物工程有限公司
代理机构 - 代理人 -
地址 450001河南省郑州市自贸试验区郑州片区(经开)经开第六大街133号1号厂房3号楼6层
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及酶活分析技术领域,具体涉及一种检测T4多聚核苷酸激酶去磷酸化活性的方法、试剂盒。本发明通过设计5’端和3’端均为磷酸修饰的核酸链作为反应底物,由于5’端已提前设置磷酸修饰结构,阻止待测T4多聚核苷酸激酶的5’磷酸化活性,使整个检测过程中仅发生3’去磷酸化反应,获得5’端为磷酸修饰、3’端为羟基的核酸链反应产物,通过检测反应一定时间后,反应混合液中反应产物和反应底物的含量关系,以单位时间内反应底物转化为反应产物的转化率定义T4多聚核苷酸激酶的去磷酸化活性。整个检测方法,操作简便,易于控制。