利用CRISPR/Cas9系统对橡胶草或蒲公英基因定点突变的方法

基本信息

申请号 CN202011140708.9 申请日 -
公开(公告)号 CN112280799A 公开(公告)日 2021-01-29
申请公布号 CN112280799A 申请公布日 2021-01-29
分类号 C12N15/82;C12N15/29;A01H5/00;A01H6/14 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 覃碧;刘实忠;王锋;张立群;杨玉双;聂秋海;张继川;王肖肖 申请(专利权)人 北京玲珑蒲公英科技发展有限公司
代理机构 北京路浩知识产权代理有限公司 代理人 商秀玲
地址 571101 海南省海口市龙华区学院路4号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及植物基因编辑技术领域,具体涉及利用CRISPR/Cas9系统对橡胶草或蒲公英基因定点突变的方法。本发明的基因定点突变的方法中,针对目标基因设计基于CRISPR/Cas9的打靶sgRNA序列,使用一个CmYLCV启动子可驱动多个sgRNA,采用20bp的Csy4发夹序列对不同的打靶sgRNA进行间隔构建CRISPR/Cas9载体并转入携带靶基因的受体材料中,获得靶基因定点突变的突变植株。本发明的方法极大地提高多靶标同时敲除载体构建的效率和基因突变率,具有实验周期短、操作简便等特点,为橡胶草、蒲公英的基因突变奠定技术基础,为橡胶草、蒲公英改良育种提供了新方法。