一种利用红色荧光蛋白用做水稻转化筛选标记的转化方法

基本信息

申请号 CN201010563552.5 申请日 -
公开(公告)号 CN102199619B 公开(公告)日 2013-05-15
申请公布号 CN102199619B 申请公布日 2013-05-15
分类号 C12N15/82(2006.01)I;C12N15/65(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 邓兴旺;王海洋;万向元;周君莉 申请(专利权)人 北京凯拓迪恩生物技术研发中心有限责任公司
代理机构 - 代理人 -
地址 100085 北京市海淀区上地西路39号北大生物城
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种利用红色荧光蛋白做筛选标记的转化方法。我们合成了FP基因并根据水稻密码子偏好性进行了修改,用它作为水稻转化和植株再生的筛选标记基因。FP基因由愈伤组织/种皮特异启动子驱动,并与目的基因紧密连接,由农杆菌介导转入水稻胚性愈伤。在共培养后的30天内利用荧光显微镜进行三次筛选。获得的转基因苗利用PCR以及Southern杂交进一步验证,结果表明,转基因苗阳性率高达80%,证明了FP作为植物转化的筛选标记是完全可行的。本发明有效降低了传统筛选标记如抗生素和除草剂抗性基因对环境和食品安全的潜在危害,是一种新型的安全的植物遗传转化筛选系统。