一种全血DNA快速提取方法

基本信息

申请号 CN201710355571.0 申请日 -
公开(公告)号 CN107058295B 公开(公告)日 2020-07-28
申请公布号 CN107058295B 申请公布日 2020-07-28
分类号 C12N15/10 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 汪德鹏;陶江明;陈逢;张笋;郭启明;王圆;黄萌;汤环宇 申请(专利权)人 武汉希望组生物科技有限公司
代理机构 武汉河山金堂专利事务所(普通合伙) 代理人 胡清堂
地址 430075 湖北省武汉市东湖开发区高新大道666号武汉国家生物产业基地项目B、C、D区研发楼B1栋
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种全血DNA快速提取方法,步骤包括:S1、将血液样本高速离心后去掉上清液,保留沉淀,加入裂解液后混匀至澄清状态,置于50~60℃水浴40‑60min,冷却后采用有机溶剂抽提,离心后取上清液;S2、向上清液中加入异丙醇和NaAc,混匀后收集沉淀,清洗沉淀后晾干;S3、向沉淀中加入TEN缓冲液和核糖核酸酶,混匀后温育30min,再加入含有蛋白酶K的TEN缓冲液,混匀,水浴30min,冷却后离心,取上清液纯化得到纯净DNA。该方法对样本的处理量大,先通过高速离心去除大部分位于上清液的红细胞,再将沉淀的血细胞(白细胞)用自配的全细胞裂解液一步裂解血细胞,从血液中快速大量的得到适于三代测序的DNA。