一种病原微生物检测用测序文库的构建方法专利查询专利号|摘要-满商公司网

一种病原微生物检测用测序文库的构建方法

基本信息

申请号	CN202011138869.4	申请日	-
公开（公告）号	CN112011835A	公开（公告）日	2020-12-01
申请公布号	CN112011835A	申请公布日	2020-12-01
分类号	C40B50/06(2006.01)I	分类	组合技术〔8〕;
发明人	曾志鹏;张鹏;邢宽;谢珍;何志健;何贵伦;安雪茹;张艳英	申请（专利权）人	南京实践医学检验有限公司
代理机构	南京瑞华腾知识产权代理事务所（普通合伙）	代理人	南京实践医学检验有限公司
地址	210000江苏省南京市江北新区新锦湖路3-1中丹生命科学园一期A栋813-4室
法律状态	-

摘要

本发明公开了一种病原微生物检测用测序文库的构建方法，包括S1，从样本中提取得到DNA和RNA，对RNA进行逆转录；S2，往步骤S1中加入二链合成反应液和二链合成酶，使RNA/cDNA复合双链形成双链cDNA；S3，纯化；S4，在S3得到的纯化产物中加入DNA打断修复反应液和DNA打断修复酶混合物，对产物同时进行片段化、末端修复和加A尾；S5，不纯化，向上述片段化的溶液中直接加入接头、接头反应液和连接酶进行接头连接，得接头连接产物；S6，纯化；S7，文库扩增；S8，纯化S7中的扩增产物得到原始DNA/RNA可测序的文库。本发明耗时短；对RNA一链合成和二链合成时，只对RNA起作用，不干扰体系中存在的DNA，待RNA转成双链cDNA后与双链DNA一起片段化，真正做到了一个流程实现共建库的效果。