双顺反子表达载体、表达系统、制备方法及应用

基本信息

申请号 CN201611024593.0 申请日 -
公开(公告)号 CN106520832B 公开(公告)日 2020-02-18
申请公布号 CN106520832B 申请公布日 2020-02-18
分类号 C12N15/85;C12N15/65;C12N15/67;C12N15/66 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 王天云;贾岩龙;郭潇;王稳;陈思佳;王俐;张俊河;李琴;田政伟;徐丹华 申请(专利权)人 河南沃尔瑞生物科技有限公司
代理机构 郑州睿信知识产权代理有限公司 代理人 新乡医学院
地址 453003 河南省新乡市金穗大道东段
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种双顺反子表达载体、表达系统、制备方法及应用,属于基因工程技术领域。该表达载体包含核基质结合区序列、内核糖体进入位点序列和筛选标记,通过在启动子与IRES序列之间插入目的基因,可构成目的基因‑IRES序列‑筛选标记基因依次连接的双顺反子序列。表达载体的结构为:MAR‑启动子‑目的基因‑IRES序列‑筛选标记‑PolyA‑MAR。该载体利用一个启动子实现目的基因和筛选标记的同时表达,可减少由于不同表达框存在导致的假阳性细胞克隆,提高阳性细胞克隆筛选率,并克服传统载体目的基因与筛选标记表达不均衡的问题;载体上包含MAR序列能克服转基因沉默,实现转基因在宿主细胞中的高效、长期表达。