一种灭活的白细胞介素-2基因工程人胃癌细胞瘤苗的制备方法

基本信息

申请号 CN200810036026.6 申请日 -
公开(公告)号 CN101560497A 公开(公告)日 2009-10-21
申请公布号 CN101560497A 申请公布日 2009-10-21
分类号 C12N5/10(2006.01)I;C12N15/26(2006.01)I;C12N15/867(2006.01)I;C12N13/00(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 陈诗书;钱关祥 申请(专利权)人 上海四胜企业管理咨询有限公司
代理机构 - 代理人 -
地址 200025上海市重庆南路227号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种灭活的白细胞介素-2基因工程人胃癌细胞瘤苗的制备方法。从经PHA诱导的人外周血单核细胞中抽提mRNA,在体外合成cDNA,运用聚合酶链反应技术克隆了含有信号肽的白细胞介素-2 cDNA,并与缺陷型逆转录病毒载体LXSN进行重组,构建了含白细胞介素-2 cDNA的重组逆转录病毒载体L(IL-2)SN。采用安全性较高的第二代包装细胞PA317对含IL-2基因的缺陷型逆转录病毒载体L(IL-2)SN进行包装,产生出具有高滴度且不具有复制能力的重组逆转录病毒,感染人胃癌细胞株MKN-45,建立了具有白细胞介素-2表达活性的基因工程人胃癌细胞,应用60Co照射,在摸索了不同的照射剂量后,制备了灭活白细胞介素-2基因工程人胃癌细胞瘤苗。