检测杀虫晶体蛋白Bt Cry1Ab/Ac的方法及其专用酶联免疫试剂盒

基本信息

申请号 CN201210012498.4 申请日 -
公开(公告)号 CN102590527B 公开(公告)日 2014-04-23
申请公布号 CN102590527B 申请公布日 2014-04-23
分类号 G01N33/68(2006.01)I 分类 测量;测试;
发明人 王保民;南铁贵;何丽珊;谭桂玉;孙硕;曹振;张亮;李召虎 申请(专利权)人 福建超大集团有限公司
代理机构 北京纪凯知识产权代理有限公司 代理人 中国农业大学;福建安欣睿捷生物科技有限公司
地址 100193 北京市海淀区圆明园西路2号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种检测杀虫晶体蛋白Bt?Cry1Ab/Ac的方法及其专用酶联免疫试剂盒。该方法及试剂盒所使用的抗Bt?Cry1Ab/Ac的单克隆抗体是由杂交瘤细胞株Bt2F9分泌产生的,该杂交瘤细胞株在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC?No.5162。本发明所提供单克隆抗体是同时以Bt?Cry1Ac蛋白溶液和转Bt?Cry1Ac基因棉花植株叶片的提取液为包被抗原,通过间接非竞争ELISA方法对杂交瘤细胞进行筛选得到的、对在植物中表达的Bt?Cry1Ab/Ac蛋白具有高亲和力的抗体,亲和常数为1.03×109M-1;利用该单克隆抗体制备得到的双抗夹心酶联免疫试剂盒,用于定性或定量检测棉花、玉米等转基因植物中的Bt?Cry1Ab/Ac蛋白,线性检测范围在0.78~50ng/mL,具有快速、灵敏的优点。