转基因猪的培育方法和应用

基本信息

申请号 CN201810150399.X 申请日 -
公开(公告)号 CN108486152A 公开(公告)日 2018-09-04
申请公布号 CN108486152A 申请公布日 2018-09-04
分类号 C12N15/85;C12N5/10;A01K67/027;A61L27/36;A61L27/38 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 胡勇;于寅 申请(专利权)人 铸造生物科技(深圳)有限公司
代理机构 深圳中一联合知识产权代理有限公司 代理人 铸造生物科技(深圳)有限公司
地址 518000 广东省深圳市南山区西丽街道留仙村路87号海穗大厦402室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开一种转基因猪的培育方法。所述转基因猪的培育方法至少包括将猪原代体细胞导入信使RNA编码的细胞重编程开关基因和/或miR302/367簇,使其诱导为RNA诱导性多能干细胞;在Cas9‑gRNA和CRE同源重组酶的作用下,敲除猪有毒基因的同时敲入若干个人基因片段,采用人源vWF基因原位替换猪内源vWF基因,获得PERV病毒灭活、且无人免疫排斥和凝血不兼容的基因;筛选出没有脱靶效应的干净中靶细胞系并将其培养成猪体细胞;采用体细胞核转移技术处理猪体细胞获得转基因猪。本发明获得的转基因猪具有PERV病毒永久性无法表达、对人体无免疫排斥和凝血兼容等优点,可用作人异源器官、组织、细胞的供体。