一种重叠延伸PCR结合Sanger测序检测不连续多DNA位点的方法

基本信息

申请号 CN201811642890.0 申请日 -
公开(公告)号 CN110157781A 公开(公告)日 2019-08-23
申请公布号 CN110157781A 申请公布日 2019-08-23
分类号 C12Q1/686;C12Q1/6869;C12N15/11 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 郑焱;陈佩璇;卢炫廷;邱美兰;谢龙旭;邱雪莲;吴丹叶;徐爱娟 申请(专利权)人 广州凯普医学检验所有限公司
代理机构 广州粤高专利商标代理有限公司 代理人 广州凯普医药科技有限公司;广州凯普医学检验所有限公司;广州凯普生物科技有限公司
地址 510000 广东省广州市黄埔区九龙镇中新知识城凤凰三横路71号2号试剂车间四楼
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种重叠延伸PCR结合Sanger测序检测不连续多DNA位点的方法,本方法一对用于重叠延伸PCR的全长扩增的引物,其核苷酸序列如SEQ ID No.1~2所示。本发明通过一次PCR将不连续的位点连接成一条DNA片段,对这条包含多个检测位点所在片段,可以一次性进行Sanger测序分析,利用本发明可以将任意的2~4个包含各自检测位点的片段拼接连接形成融合片段,快速、简单,不需要限制性内切酶,中间无任何非目的基因的DNA序列,进而检测的检测突破了Sanger测序读长的限制,可以通过一个Sanger测序反应同时检测多个不连续的DNA位点。