一种微小型节肢昆虫基因组长片段DNA提取方法
基本信息
申请号 | CN201710918615.6 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN107557357A | 公开(公告)日 | 2018-01-09 |
申请公布号 | CN107557357A | 申请公布日 | 2018-01-09 |
分类号 | C12N15/10(2006.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 史典义;曹晓黎;范丽丽;张艺;熊玉宇;洪绵娥 | 申请(专利权)人 | 晶能生物技术(上海)有限公司 |
代理机构 | 上海科律专利代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人 | 袁亚军;金碎平 |
地址 | 201111 上海市闵行区元江路5500号第2幢1187室 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种微小型节肢昆虫基因组长片段DNA提取方法,包括:步骤S1)、材料研磨收集细胞核:采用成虫个体作为起始材料,对虫体组织裂解去除虫体躯壳,获得细胞悬浮液;步骤S2)、胶块包埋:将所述细胞悬浮液与琼脂糖混合冷凝制成胶块;步骤S3)、蛋白酶K消化:将所述将胶块放置于蛋白酶K消化液中,并放置于水浴锅中孵育;步骤S4)、消化洗涤:在所述胶块中加入RNA消化酶后温育后,采用冲洗缓冲液洗涤。本发明通过滤纸包裹挤压螨虫体液,低温低速离心以及滤膜过滤等步骤,去除虫体组织的躯壳残留,DNA提取效果好,使提取的长片段DNA可以满足全基因组测序的要求。 |
