一种游离DNA文库构建方法以及游离DNA中低频突变的检测方法

基本信息

申请号 CN201610273808.6 申请日 -
公开(公告)号 CN105821481B 公开(公告)日 2019-03-19
申请公布号 CN105821481B 申请公布日 2019-03-19
分类号 C40B50/06(2006.01)I; C12Q1/6869(2018.01)I; C12Q1/6883(2018.01)I; C12Q1/6886(2018.01)I 分类 组合技术〔8〕;
发明人 田埂 申请(专利权)人 元码基因科技(苏州)有限公司
代理机构 北京布瑞知识产权代理有限公司 代理人 元码基因科技(苏州)有限公司
地址 215100 江苏省苏州市吴中区桑田街218号生物科技园2栋402
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及一种游离DNA的文库构建方法,在单链游离DNA的3’端连接唯一序列标签,其中,唯一序列标签由随机序列和接头序列组成;加入PCR扩增用上游引物和下游引物进行PCR扩增,其中,上游引物为针对目标低频突变设计的引物,下游引物为与接头序列对应的引物。此外,本发明还涉及一种游离DNA中低频突变的检测方法,在单链游离DNA的3’端连接唯一序列标签,加入PCR扩增用上游引物和下游引物进行PCR扩增,上游引物和下游引物的一端分别与测序标签连接,将扩增后的DNA在Illumina平台上上机测序。本发明方法能够简单、高效的实现对cfDNA低频突变的检测,并可通过对cfDNA的检测,达到对胎儿遗传或者肿瘤细胞突变检测的目的。