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可溶性SARS病毒核衣壳蛋白的表达和纯化

基本信息

申请号	CN03129077.9	申请日	-
公开（公告）号	CN1472318A	公开（公告）日	2004-02-04
申请公布号	CN1472318A	申请公布日	2004-02-04
分类号	C12N15/11;C12N15/63;C12N15/70;C12N15/50;C07K14/165;C07K1/36;C07H21/00	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	沈旭;蒋华良;陈克勤;陈静;沈建华;罗小民;陈凯先;庄贤韩	申请（专利权）人	上海单抗制药技术有限公司
代理机构	隆天国际知识产权	代理人	楼仙英
地址	201203上海市浦东张江高科技园区祖冲之路555号
法律状态	-

摘要

本发明提供可在宿主细胞中表达可溶性SARS病毒N蛋白的表达质粒N－pQE30(保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日2003年5月30日，保藏号CCTCC No.M203046)。还提供在宿主细胞中表达可溶性SARS病毒N蛋白的方法，包括：采用PCR技术从SARS病毒cDNA文库中获得SARS病毒N蛋白DNA片段(TRO2)；用pQE30载体构建SARS病毒N蛋白表达质粒pQE30－N；和将pQE30－N质粒转化于宿主细胞中，并在宿主细胞中表达。进一步提供可溶性SARS病毒N蛋白表达产物的纯化方法，包括将细胞裂解液进行透析、NTA－Ni柱层析和分子筛纯化。本发明的方法操作简单、得到的蛋白纯度高。