胺转氨酶AcATA突变体及其在制备西他列汀中间体中的应用

基本信息

申请号 CN202010275136.9 申请日 -
公开(公告)号 CN111549008B 公开(公告)日 2021-07-23
申请公布号 CN111549008B 申请公布日 2021-07-23
分类号 C12N9/10(2006.01)I;C12N15/54(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12P17/12(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 柳志强;程峰;李明友;张晓健;贾东旭;郑裕国;何人宝;金逸中;林娇华 申请(专利权)人 浙江永太药业有限公司
代理机构 杭州之江专利事务所(普通合伙) 代理人 牛世静
地址 310014浙江省杭州市下城区潮王路18号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种胺转氨酶AcATA突变体及其在制备西他列汀中间体中的应用,该胺转氨酶AcATA突变体由SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第122位进行单突变获得;其中,第122位的甲硫氨酸突变成组氨酸、缬氨酸或苯丙氨酸。本发明通过分子对接和同源建模等方法获得可能影响其催化活性的位点,并进行了定点突变,最终得到的胺转氨酶AcATA突变体不仅具有较高的酶活,酶活均高于460U/g,均是野生型的4倍以上;而且能够高效催化西他列汀中间体前体酮1‑哌啶‑4‑(2,4,5‑三氟苯基)‑1,3‑二丁酮合成西他列汀中间体(R)‑3‑氨基‑1‑哌啶‑4‑(2,4,5‑三氟苯基)‑1‑丁酮,24h转化率高达90%。