(R)-ω-转氨酶突变体及其在制备西他列汀中间体中的应用

基本信息

申请号 CN202010273326.7 申请日 -
公开(公告)号 CN111534494B 公开(公告)日 2021-10-01
申请公布号 CN111534494B 申请公布日 2021-10-01
分类号 C12N9/10(2006.01)I;C12N15/54(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12P17/10(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 柳志强;彭晨;贾东旭;李军良;程峰;张晓健;郑裕国;何人宝;金逸中;林娇华 申请(专利权)人 浙江永太药业有限公司
代理机构 杭州之江专利事务所(普通合伙) 代理人 牛世静
地址 310014浙江省杭州市下城区潮王路18号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种(R)‑ω‑转氨酶突变体及其在制备西他列汀中间体中的应用,该突变体由SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第77位的精氨酸、第181位的亮氨酸、第130位的精氨酸、第139位的酪氨酸和第273位苏氨酸经多点突变得到。本发明通过基因挖掘技术筛选新型的(R)‑ω‑TA重组酶,并通过蛋白质工程技术进行分子改造,获得了高酶活、高底物耐受性和高立体选择性的(R)‑ω‑TA突变体催化剂,该突变体能够以前体酮类似物1‑(吡咯烷‑1‑基)‑4‑(2,4,5‑三氟苯基)‑1,3‑丁二酮为底物不对称催化合成西他列汀中间体(R)‑3‑氨基‑1‑(吡咯烷‑1‑基)‑4‑(2,4,5‑三氟苯基)丁‑1‑酮,且转化率较高,最高可达到94.6%。