一种(R)-ω-转氨酶突变体及其应用

基本信息

申请号 CN202010273576.0 申请日 -
公开(公告)号 CN111411094B 公开(公告)日 2021-10-01
申请公布号 CN111411094B 申请公布日 2021-10-01
分类号 C12N9/10(2006.01)I;C12N15/54(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12P41/00(2006.01)I;C12P17/10(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 柳志强;贾东旭;彭晨;李军良;程峰;张晓健;郑裕国;何人宝;金逸中;林娇华 申请(专利权)人 浙江永太药业有限公司
代理机构 杭州之江专利事务所(普通合伙) 代理人 牛世静
地址 310014浙江省杭州市下城区潮王路18号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种(R)‑ω‑转氨酶突变体及其应用,该突变体由SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第182位的亮氨酸、第79位精氨酸、第51位的谷氨酰胺、第149位的缬氨酸、第235位亮氨酸和第216位甘氨酸,经多点突变得到。本发明通过基因挖掘技术筛选新型的(R)‑ω‑TA酶,并通过蛋白质工程技术进行分子改造,获得了高酶活、高底物耐受性和高立体选择性的(R)‑ω‑TA突变体催化剂,该突变体能够生物催化前体酮类似物1‑(3‑氧吡咯烷‑1‑基)‑4‑(2,4,5‑三氟苯基)‑1,3‑丁二酮合成西他列汀中间体(R)‑1‑[3‑氨基‑4‑(2,4,5‑三氟苯基)丁酰基]吡咯‑3‑酮,且转化率较高,最高可达到95.4%,对于突破西他列汀生物催化制备技术具有里程碑意义。