一种Il21基因敲除小鼠模型及其构建方法、应用
基本信息
申请号 | CN202011540705.4 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN112662669A | 公开(公告)日 | 2021-04-16 |
申请公布号 | CN112662669A | 申请公布日 | 2021-04-16 |
分类号 | C12N15/113;C12N15/85;C12N15/89;C12N5/10;A01K67/027;A01K67/02;A61K49/00 | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 史培良;樊皓月;辛闻婷 | 申请(专利权)人 | 成都药康生物科技有限公司 |
代理机构 | 成都行之专利代理事务所(普通合伙) | 代理人 | 唐邦英 |
地址 | 610000 四川省成都市温江区成都海峡两岸科技产业开发园青啤大道319号“海科电子信息产业园”1栋1003楼 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种Il21基因敲除小鼠模型及其构建方法、应用,构建方法包括以下步骤:S1、基于CRISPR/Cas9技术,确定Il21基因的敲除区域,根据确定的敲除区域设计特异性靶位点sgRNA1和sgRNA2,gRNA1和gRNA2的基因序列分别如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示;S2、将有活性的gRNA1、gRNA2、cas9蛋白显微注射入小鼠受精卵中,取注射后存活的受精卵移植到假孕雌鼠体内,待其怀孕产仔获得F0代小鼠;S3、将步骤S2获得的F0代小鼠与野生型小鼠交配,获得的F1代杂合子;S4、将步骤S3获得的F1代杂合子近交获得F2代小鼠即为IL21基因敲除小鼠模型。本发明基于CRISPR/Cas9技术,通过设计合理的异性靶位点gRNA1和gRNA2基因序列,首次通过敲除Il21基因的ENSMUST00000029273.7转录本中exon3‑exon5区域建立了小鼠动物模型,能够在肿瘤愈后相关研究中的应用。 |
