一株可以高效分泌纳豆激酶的枯草芽孢杆菌株及高纯纳豆激酶制备工艺
基本信息
| 申请号 | CN201710221567.5 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN107058204A | 公开（公告）日 | 2017-08-18 |
| 申请公布号 | CN107058204A | 申请公布日 | 2017-08-18 |
| 分类号 | C12N1/21(2006.01)I;C12N15/75(2006.01)I;C12N9/54(2006.01)I;C12R1/125(2006.01)N | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 张建华;崔青;龚文秀;钱丙俊;李希强;姚晓敏;王杰;刘华奇 | 申请（专利权）人 | 上海诺金科生物科技有限公司 |
| 代理机构 | 上海申新律师事务所 | 代理人 | 上海诺金科生物科技有限公司 |
| 地址 | 201201 上海市浦东新区张江高科技产业东区瑞庆路528号10幢甲 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 一株可以高效分泌纳豆激酶的枯草芽孢杆菌菌株，利用PCR技术扩增纳豆枯草芽孢杆菌NK的aprN基因，并依据枯草芽孢杆菌的密码子偏爱性优化了起始30个氨基酸的密码子，构建重组表达质粒pHT01‑aprN，经限制性酶切、PCR扩增和测序验证其正确性。通过电击法将pHT01‑aprN导入枯草芽孢杆菌168(Bacillus subtilis 168)，利用氯霉素抗性筛选获得工程菌。优化发酵条件后，经IPTG诱导表达，摇床培养发酵液中最高酶活为289U/ml，高密度发酵发酵液中最高酶活达到7778U/ml，经亲和柱层析制备高纯纳豆激酶酶制剂最高酶活为981731U/g。 |
