用于基因定点修饰的TALE重复片段的高效合成方法

基本信息

申请号 CN201210380206.2 申请日 -
公开(公告)号 CN102864158B 公开(公告)日 2014-04-23
申请公布号 CN102864158B 申请公布日 2014-04-23
分类号 C12N15/31(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I;C12R1/64(2006.01)N 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 魏文胜;杨君娇;袁鹏飞 申请(专利权)人 广州辑因医疗科技有限公司
代理机构 北京路浩知识产权代理有限公司 代理人 王朋飞;张庆敏
地址 100871 北京市海淀区颐和园路5号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及一种TALE重复片段的合成方法。本发明通过对用于PCR扩增的DNA模板以及引物的设计,使用尿嘧啶脱氧核糖核苷酸切除法用尿嘧啶切除试剂(uracil-specific?excision?reagent:USER)制造DNA片段两端的粘性末端,将含单个、二个或三个TALE重复单位的多个DNA片段按正确顺序连接进载体,获得能表达特异性结合靶基因的TALE蛋白的重组载体,并利用重组载体在细胞中完成靶基因敲除、敲入或过表达、抑制表达。本发明方法省时、简便、正确率高,能够实现高通量、自动化需求。