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一种提取木瓜凝乳蛋白酶的方法

基本信息

申请号	CN200410046107.6	申请日	-
公开（公告）号	CN1264976C	公开（公告）日	2006-07-19
申请公布号	CN1264976C	申请公布日	2006-07-19
分类号	C12N9/00(2006.01);C12N9/50(2006.01)	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	卢世昌;刘俊凤	申请（专利权）人	广州伟仕科技有限公司
代理机构	北京纪凯知识产权代理有限公司	代理人	广州伟仕科技有限公司
地址	510665广东省广州天河区中山大道建中路3号304室伟仕公司
法律状态	-

摘要

本发明公开了一种提取木瓜凝乳蛋白酶的方法，涉及酶制剂领域。本发明所提供的方法，包括如下步骤：1)制备番木瓜幼果浆或番木瓜幼果浆干燥物的磷酸盐缓冲液溶液；2)加入壳聚糖溶液，沉淀后取上清液；3)加入硫酸铵，至溶液中硫酸铵的饱和度为30-40％，保留上清液；4)加入硫酸铵，至溶液中硫酸铵的饱和度为40-50％，保留上清液；5)加入过量的酒石酸使溶液的pH＜2.5，絮凝沉淀后，保留上清液；6)加入硫酸铵，至溶液中硫酸铵的饱和度为65-70％，收集沉淀物；7)超滤，收集浓缩液；8)加入等量磷酸钠缓冲液，混均；9)用阳离子纤维素CM-C92层析柱分离木瓜凝乳蛋白酶；10)以截留分子量为1万的聚砜中空纤维超滤膜浓缩木瓜凝乳蛋白酶洗脱液，得到木瓜凝乳蛋白酶浓缩液。