一种高产A40926菌株的基因重组迭代复合诱变选育方法

基本信息

申请号 CN202011567813.0 申请日 -
公开(公告)号 CN112626062A 公开(公告)日 2021-04-09
申请公布号 CN112626062A 申请公布日 2021-04-09
分类号 C12N15/01;C12N13/00;C12N15/03;C12N1/21;C12R1/01 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 朱辉;易欣;曹艳茹;汪玉兰;韩晓彤;严华聪;吴亚澜;罗靓 申请(专利权)人 成都雅途生物技术有限公司
代理机构 四川省成都市天策商标专利事务所 代理人 龚海月
地址 610041 四川省成都市高新区科园南路88号天府生命科技园B7号楼6楼
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种高产A40926菌株的基因重组迭代复合诱变选育方法,对A40926产生菌出发菌株采用ARTP诱变处理,结合缬氨酸抗性筛选,获得相对高产菌株;选择一株或几株相对高产菌株制备(混合)菌悬液,添加溶菌酶溶液酶解处理一定时间,获得原生质体悬液,原生质体悬液均分后分别热灭活和紫外灭活后得到双亲本灭活标记原生质体,将双亲本灭活标记的原生质体融合,涂布于抗性再生培养基中,融合子菌株经摇瓶发酵培养,筛选获得第一代高产A40926菌株,然后进行多轮迭代“ARTP‑原生质体融合“的复合诱变选育,获得可稳定高产A40926的菌株;该菌株最终产量可达到2.0~2.2g/L,且传代6代以内具有较好的遗传稳定性。同时,与出发菌株相比,代谢产物A40926组分A1和B1含量明显提高。