rhPTH(1-34)蛋白原液的纯化方法
基本信息
申请号 | CN201911399951.X | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN111004318A | 公开(公告)日 | 2020-04-14 |
申请公布号 | CN111004318A | 申请公布日 | 2020-04-14 |
分类号 | C07K14/635(2006.01)I | 分类 | 有机化学〔2〕; |
发明人 | 樊欣迎;李静;刘月峰;张萌萌;郭静雅;闻亚磊 | 申请(专利权)人 | 北京博康健基因科技有限公司 |
代理机构 | 北京康信知识产权代理有限责任公司 | 代理人 | 北京博康健基因科技有限公司 |
地址 | 102200北京市昌平区星火街7号 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种rhPTH(1‑34)蛋白原液的纯化方法。该方法包括菌体破碎、镍离子螯合亲和层析、融合蛋白酶切、阴离子交换层析、反相层析以及阳离子交换层析的步骤,菌体破碎具体包括:取菌体,用缓冲液A重新悬浮,高压匀浆机破菌,破菌液离心,收集上清液,0.45μm滤芯过滤,收集滤过液,缓冲液A由磷酸盐缓冲液、NaCl、咪唑和水组成,其中,磷酸盐缓冲液的浓度为10mmol/L、NaCl的浓度为500mmol/L,咪唑的浓度为50~60mmol/L,缓冲液A的pH=8.0。应用本发明的技术方案,rhPTH(1‑34)蛋白原液的总收率提高到50%以上,纯度提高到99.5%以上。 |
