rhPTH(1-34)蛋白原液的纯化方法

基本信息

申请号 CN201911399951.X 申请日 -
公开(公告)号 CN111004318A 公开(公告)日 2020-04-14
申请公布号 CN111004318A 申请公布日 2020-04-14
分类号 C07K14/635(2006.01)I 分类 有机化学〔2〕;
发明人 樊欣迎;李静;刘月峰;张萌萌;郭静雅;闻亚磊 申请(专利权)人 北京博康健基因科技有限公司
代理机构 北京康信知识产权代理有限责任公司 代理人 北京博康健基因科技有限公司
地址 102200北京市昌平区星火街7号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种rhPTH(1‑34)蛋白原液的纯化方法。该方法包括菌体破碎、镍离子螯合亲和层析、融合蛋白酶切、阴离子交换层析、反相层析以及阳离子交换层析的步骤,菌体破碎具体包括:取菌体,用缓冲液A重新悬浮,高压匀浆机破菌,破菌液离心,收集上清液,0.45μm滤芯过滤,收集滤过液,缓冲液A由磷酸盐缓冲液、NaCl、咪唑和水组成,其中,磷酸盐缓冲液的浓度为10mmol/L、NaCl的浓度为500mmol/L,咪唑的浓度为50~60mmol/L,缓冲液A的pH=8.0。应用本发明的技术方案,rhPTH(1‑34)蛋白原液的总收率提高到50%以上,纯度提高到99.5%以上。