一种新型普鲁兰酶基因和高产菌株的获得方法及产酶工艺
基本信息
| 申请号 | CN201710057598.1 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN106755015A | 公开（公告）日 | 2017-05-31 |
| 申请公布号 | CN106755015A | 申请公布日 | 2017-05-31 |
| 分类号 | C12N15/56(2006.01)I;C12N15/75(2006.01)I;C12N9/44(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12R1/10(2006.01)N | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 牛丹丹;叶秀云 | 申请（专利权）人 | 福建福大百特生物科技有限公司 |
| 代理机构 | 福州元创专利商标代理有限公司 | 代理人 | 福建福大百特生物科技有限公司 |
| 地址 | 352251 福建省宁德市古田县黄田镇凤亭村新岭亭 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明通过系统比对来源于不同微生物的十个以上的普鲁兰酶基因结构相似性，选择高度保守的区域进行多序列组合设计长引物，并采用短时PCR技术，以上述不同来源的微生物染色体DNA为模板，获得相应的普鲁兰酶疑似基因碎片；并将上述基因碎片克隆入高表达载体pHY‑WZX，在枯草芽胞杆菌中进行异源表达；获得的转化子点种普鲁兰多糖筛选平板，获得透明圈显著的转化子进行摇瓶发酵确认酶活力最高的菌种。并建立了基于特种淀粉水解液的普鲁兰酶高效发酵生产新工艺；分别在25 L和30 m3发酵体系实现了普鲁兰酶的高效制备，最高酶活达到880 U/mL。 |
