一种新型β‑淀粉酶的高效制备方法

基本信息

申请号 CN201710057606.2 申请日 -
公开(公告)号 CN107058263A 公开(公告)日 2017-08-18
申请公布号 CN107058263A 申请公布日 2017-08-18
分类号 C12N9/26(2006.01)I;C12N15/56(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 牛丹丹;叶秀云 申请(专利权)人 福建福大百特生物科技有限公司
代理机构 福州元创专利商标代理有限公司 代理人 福建福大百特生物科技有限公司
地址 352251 福建省宁德市古田县黄田镇凤亭村新岭亭
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种新型β‑淀粉酶的高效制备方法。根据大麦β‑淀粉酶编码基因bba碱基序列和酿酒酵母的密码子偏好性,对上述bba基因进行密码子优化并全基因合成新的bbaP基因,并通过非高保真的DNA聚合酶在低退火温度下(45~50℃)对上述获得bbaP实施易错PCR,获得的新基因bbaPT克隆入pPIC9K载体中构建重组表达质粒pPIC‑bbaPT,在巴斯德毕赤酵母GS115中实现整合表达,筛选获得了最适作用温度显著提高的β‑淀粉酶的重组菌。获得重组β‑淀粉酶的最适作用温度为65℃,最适作用pH为5.0,最高酶活力达280 U/mL。