一种新型β-淀粉酶的高效制备方法
基本信息
| 申请号 | CN201710057606.2 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN107058263B | 公开（公告）日 | 2017-08-18 |
| 申请公布号 | CN107058263B | 申请公布日 | 2017-08-18 |
| 分类号 | C12N9/26(2006.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 牛丹丹;叶秀云 | 申请（专利权）人 | 福建福大百特生物科技有限公司 |
| 代理机构 | 福州元创专利商标代理有限公司 | 代理人 | 福建福大百特生物科技有限公司 |
| 地址 | 352251福建省宁德市古田县黄田镇凤亭村新岭亭 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明提供了一种新型β‑淀粉酶的高效制备方法。根据大麦β‑淀粉酶编码基因bba碱基序列和酿酒酵母的密码子偏好性，对上述bba基因进行密码子优化并全基因合成新的bbaP基因，并通过非高保真的DNA聚合酶在低退火温度下（45~50℃）对上述获得bbaP实施易错PCR，获得的新基因bbaPT克隆入pPIC9K载体中构建重组表达质粒pPIC‑bbaPT，在巴斯德毕赤酵母GS115中实现整合表达，筛选获得了最适作用温度显著提高的β‑淀粉酶的重组菌。获得重组β‑淀粉酶的最适作用温度为65℃，最适作用pH为5.0，最高酶活力达280 U/mL。 |
