一种基于Ion ProtonTM测序平台的血液游离DNA的文库构建方法、试剂及其应用

基本信息

申请号 CN201610139977.0 申请日 -
公开(公告)号 CN105695448A 公开(公告)日 2016-06-22
申请公布号 CN105695448A 申请公布日 2016-06-22
分类号 C12N15/10(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C40B50/06(2006.01)I;C40B40/06(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 丁聪聪;丁志远;叶佳芝;牟晓威;邱宝义;刘明明;陈贤丰 申请(专利权)人 浙江圣庭医学检验实验室有限公司
代理机构 北京华仲龙腾专利代理事务所(普通合伙) 代理人 浙江圣庭生物科技有限公司
地址 318020 浙江省台州市黄岩区东城街道东浦社区王西路41号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种基于Ion?ProtonTM测序平台的血液游离DNA的文库构建方法、试剂及其应用,构建过程包括血液游离DNA提取、末端修复、片段选择、接头连接、磁珠纯化、文库扩增、文库检测、高通量测序等步骤。本发明还提供一种用于构建基于Ion?ProtonTM测序平台的血液游离DNA文库的血液游离DNA提取试剂、末端修复试剂、接头连接反应试剂、扩增试剂。本发明明显提高了孕妇血浆胎儿游离DNA的提取浓度,且步骤简单,成本低,提高了建库的成功率;优化后的文库构建体系更利于操作,节省成本,且更换磁珠后,纯化回收效率更高;文库扩增也不需凑够样本量和二次检测,操作更加简单。本发明方法更适用于胎儿染色体非整倍体无创产前诊断。