一种用于靶向杂交捕获的修饰性DNA杂交探针的制备方法

基本信息

申请号 CN201610124516.6 申请日 -
公开(公告)号 CN105647907B 公开(公告)日 2019-03-08
申请公布号 CN105647907B 申请公布日 2019-03-08
分类号 C12N15/10(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 郎秋蕾; 周小川; 方超; 殷楠楠; 孟佳军 申请(专利权)人 杭州联川生物技术股份有限公司
代理机构 杭州杭诚专利事务所有限公司 代理人 杭州联川生物技术股份有限公司
地址 浙江省杭州市经济技术开发区6号大街260号16幢四层
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种用于靶向杂交捕获的修饰性DNA杂交探针的制备方法主要方法为:制备DNA模板,PCR扩增,纯化PCR产物;对纯化后的PCR产物进行USER酶切割以及T4 DNA聚合酶末端平滑化,Lambda核酸外切酶水解产物的双链DNA中一条带有5′端磷酸化的单链,从而获得带有生物素标记的单链DNA;磁珠富集法纯化带有生物素标记的单链DNA,得修饰性DNA杂交探针。本发明极大了降低了生产成本、使用范围广,包括任意物种基因组的外显子区域、内含子区域、线粒体区域以及内含子区域等。所获得的DNA杂交探针可以应用于二代测序靶向文库的构建以及测序。