一种用于靶向杂交捕获的修饰性DNA杂交探针的制备方法
基本信息
申请号 | CN201610124516.6 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN105647907B | 公开(公告)日 | 2019-03-08 |
申请公布号 | CN105647907B | 申请公布日 | 2019-03-08 |
分类号 | C12N15/10(2006.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 郎秋蕾; 周小川; 方超; 殷楠楠; 孟佳军 | 申请(专利权)人 | 杭州联川生物技术股份有限公司 |
代理机构 | 杭州杭诚专利事务所有限公司 | 代理人 | 杭州联川生物技术股份有限公司 |
地址 | 浙江省杭州市经济技术开发区6号大街260号16幢四层 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种用于靶向杂交捕获的修饰性DNA杂交探针的制备方法主要方法为:制备DNA模板,PCR扩增,纯化PCR产物;对纯化后的PCR产物进行USER酶切割以及T4 DNA聚合酶末端平滑化,Lambda核酸外切酶水解产物的双链DNA中一条带有5′端磷酸化的单链,从而获得带有生物素标记的单链DNA;磁珠富集法纯化带有生物素标记的单链DNA,得修饰性DNA杂交探针。本发明极大了降低了生产成本、使用范围广,包括任意物种基因组的外显子区域、内含子区域、线粒体区域以及内含子区域等。所获得的DNA杂交探针可以应用于二代测序靶向文库的构建以及测序。 |
