使用T4噬菌体展示技术高效表达超敏蛋白的方法
基本信息
申请号 | CN201811610859.9 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN110878320A | 公开(公告)日 | 2020-03-13 |
申请公布号 | CN110878320A | 申请公布日 | 2020-03-13 |
分类号 | C12N15/70;C12N15/62;C12N7/00;C12P21/06;C07K14/27;A01N63/20;A01P21/00;A01P7/04 | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 刘胜;蒙亮;刘欣;刘军鹏;李维;石聿勇;胡艳红;张会慧 | 申请(专利权)人 | 湖北微生元生物科技有限公司 |
代理机构 | 北京市诚辉律师事务所 | 代理人 | 湖北微生元生物科技有限公司 |
地址 | 436060 湖北省鄂州市梁子湖区凤凰大道9号东湖高新科技创意城B-06栋1楼D户型和2楼D户型 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明涉及一种使用T4噬菌体展示技术高效表达超敏蛋白的方法,所述的方法包括如下步骤:(1)将所述超敏蛋白的编码基因与TEV蛋白酶、T4噬菌体Hoc蛋白基因片段依次连接,制备融合重组蛋白编码基因,所述超敏蛋白的编码区在TEV‑Hoc融合蛋白基因的上游,且表达框一致;(2)将所述融合重组蛋白的编码基因转入pUC18质粒中;(3)将所述质粒转入大肠杆菌宿主中;(4)使用Hoc蛋白缺失的Hoc‑T4噬菌体感染所述的大肠杆菌宿主,培养宿主表达展示所述融合重组蛋白的T4噬菌体;(5)分离展示有所述融合重组蛋白的T4噬菌体;(6)从所述T4噬菌体中分离所述融合重组蛋白,TEV蛋白酶切后获得所述超敏蛋白。 |
