一种基因工程技术制备共表达重组酶的方法

基本信息

申请号 CN201310720225.X 申请日 -
公开(公告)号 CN103710329A 公开(公告)日 2014-04-09
申请公布号 CN103710329A 申请公布日 2014-04-09
分类号 C12N9/90(2006.01)I;C12N9/92(2006.01)I;C12N15/61(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 王晓艳;门燕;冯俊敏;孙媛霞;张佩舜;朱玥明;康振奎;巩晋龙;郑丽萍;王小鹏;李奠础 申请(专利权)人 山西天骄生物集团有限公司
代理机构 太原高欣科创专利代理事务所(普通合伙) 代理人 山西天骄食业有限公司;中国科学院天津工业生物技术研究所;山西天骄生物集团有限公司
地址 030500 山西省吕梁市交城县成村工业园区
法律状态 -

摘要

摘要 本发明属于双酶共表达技术领域,具体涉及的是定点突变的葡萄糖异构酶和D-阿洛酮糖3-差向异构酶共表达;本发明为了克服现有技术的不足,提供一种对葡萄糖异构酶146位氨基酸定点突变,并与D-阿洛酮糖3-差向异构酶共表达的方法,具体为:将定点突变后的葡萄糖异构酶的核苷酸序列与D-阿洛酮糖3-差向异构酶核苷酸序列分别进行PCR扩增、纯化、克隆;将克隆得到的双酶核苷酸序列分别与pCDFDuet-1载体进行双酶切,酶切产物纯化连接,构建重组表达质粒,诱导表达得到重组菌,收集重组菌超声破碎得到含有双酶的粗酶液。