一种适用于单链DNA的高通量测序文库构建方法

基本信息

申请号 CN201811073055.X 申请日 -
公开(公告)号 CN110904512A 公开(公告)日 2020-03-24
申请公布号 CN110904512A 申请公布日 2020-03-24
分类号 C40B50/06;C12Q1/6806;C12Q1/6886 分类 组合技术〔8〕;
发明人 李志隆;汪宇盈;叶明芝;叶李莉;刘继龙;宋炎;陈双双 申请(专利权)人 天津华大医学检验所有限公司
代理机构 北京纪凯知识产权代理有限公司 代理人 广州华大基因医学检验所有限公司;深圳华大基因股份有限公司;深圳华大临床检验中心;天津华大医学检验所有限公司;华大数极生物科技(深圳)有限公司
地址 510006 广东省广州市番禺区小谷围街中二横路22号A305房
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种适用于单链DNA的高通量测序文库构建方法。本发明方法包括:将单链模板与带有简并碱基的双链接头1相连(带有简并碱基的特殊接头使单链模板与双链接头连接成为可能,双链接头可随机地结合到单链模板上,使接头序列与模板充分靠近,再使用T4 DNA连接酶完成连接);采用延伸引物进行延伸,得到双链产物;将双链产物与接头2相连;以所得连接产物为模板,进行PCR扩增,获得所需文库。本发明可用于构建高通量测序文库,且可用于单链DNA文库构建,本发明将提高高通量测序文库构建中单链DNA利用率,进一步实现低起始量建库的目的,在未来肿瘤早筛和预后监测应用中发挥关键作用。