甘蔗花叶病和宿根矮化病病原的多重PCR检测方法专利查询专利号|摘要-满商公司网

甘蔗花叶病和宿根矮化病病原的多重PCR检测方法

基本信息

申请号	CN200710193814.1	申请日	-
公开（公告）号	CN101186948B	公开（公告）日	2011-06-29
申请公布号	CN101186948B	申请公布日	2011-06-29
分类号	C12Q1/68(2006.01)I;C07H21/00(2006.01)I	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	杨本鹏;张显勇;张树珍;蔡文伟	申请（专利权）人	广西康田农业科技股份有限公司
代理机构	海口翔翔专利事务有限公司	代理人	中国热带农业科学院热带生物技术研究所;广西康田农业科技股份有限公司
地址	571101 海南省海口市城西学院路4号
法律状态	-

摘要

本发明公开了一种甘蔗花叶病和宿根矮化病病原的多重PCR检测方法，其特征是：(1)取甘蔗植株茎基部带鞘叶片为检测样品；(2)设计反转录引物和PCR检测引物对：cpc1、cpc2，RSD引物对F1、F2；对甘蔗花叶病毒和甘蔗宿根矮化病病原的基因片段进行扩增；(3)提取总核酸，将其中的RNA反转录成cDNA；(4)设计该一步法多重RT-PCR的反应体系和扩增程序，将核酸进行扩增；(5)利用凝胶电泳分析扩增结果及特异性，同时利用十倍递进稀释法检测该一步法多重RT-PCR的敏感度。本发明所提供的检测方法通过提取甘蔗的总核酸，在同一个PCR管中完成反转录及PCR反应就可以同时检测出这两种病害的病原，具有操作简单、节省时间、成本低、特异性和敏感性高等优点。