甘蔗条螟蜕皮调节转录因子cDNA及其克隆方法与重组应用

基本信息

申请号 CN201210059617.1 申请日 -
公开(公告)号 CN102586259B 公开(公告)日 2013-12-25
申请公布号 CN102586259B 申请公布日 2013-12-25
分类号 C12N15/12(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I;C07K14/435(2006.01)I;A23K1/16(2006.01)I;A01H5/00(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 刘志昕;张雨良;张树珍;王健华;熊国如;余乃通;王俊刚 申请(专利权)人 广西康田农业科技股份有限公司
代理机构 郑州联科专利事务所(普通合伙) 代理人 中国热带农业科学院热带生物技术研究所;广西康田农业科技股份有限公司
地址 571101 海南省海口市龙华区学院路4号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明属于生物基因工程领域,甘蔗条螟蜕皮调节转录因子CsHR3具有SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示的序列。本发明克隆方法是:从甘蔗条螟预蛹期幼虫中提取总RNA,反转录合成cDNA;根据不同鳞翅目昆虫蜕皮调节转录因子的保守序列设计简并引物,PCR扩增甘蔗条螟CsHR3基因的中间片段,再通过3’-RACE技术设计特异性引物,成功获得CsHR3基因1266bp片段。本发明采用细菌介导RNAi技术在RNaseⅢ缺陷型大肠杆菌HT115中表达dsRNA,获得具有生物活性的dsRNA,通过饲喂甘蔗条螟幼虫来沉默甘蔗条螟蜕皮调节转录因子CsHR3基因,使甘蔗条螟不能蜕皮或破坏其正常生长发育过程,从而用于甘蔗条螟害虫的生物防治;或者通过基因工程方法将甘蔗条螟蜕皮调节转录因子转入作物,获得具有抗虫能力的作物。