一种三轮扩增的多重PCR方法

基本信息

申请号 CN201510761091.5 申请日 -
公开(公告)号 CN105219766B 公开(公告)日 2017-12-22
申请公布号 CN105219766B 申请公布日 2017-12-22
分类号 C12N15/10(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C40B50/06(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 肖君华;陈科 申请(专利权)人 上海翼和应用生物技术有限公司
代理机构 上海泰能知识产权代理事务所 代理人 黄志达
地址 201620 上海市松江区松江新城人民北路2999号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及一种三轮扩增的多重PCR方法、引物及其试剂盒,以及在建立二代测序平台文库的用途。在前两轮PCR反应时,将低浓度的特异引物尽可能地消耗,以减少不同扩增子的差异、提高多重PCR产物的均一性。第三轮PCR反应时添加携带不同条形码序列的接头引物以标示不同模板,而不同的接头引物携带相同的通用扩增引物,保证不同模板扩增效率一致,以减少不同模板扩增产物的差异。不仅改善了普通多重PCR扩增均一性差的问题,而且可以快速方便的完成测序文库的构建。