一种利用发夹引物进行多重PCR的方法

基本信息

申请号 CN201610736856.4 申请日 -
公开(公告)号 CN106282353B 公开(公告)日 2019-12-10
申请公布号 CN106282353B 申请公布日 2019-12-10
分类号 C12Q1/686(2018.01); C40B50/06(2006.01) 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 肖君华; 陈科; 陈轶群 申请(专利权)人 上海翼和应用生物技术有限公司
代理机构 上海泰能知识产权代理事务所 代理人 黄志达
地址 200233 上海市徐汇区漕河泾开发区桂平路471号桂果园8号楼4F室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及一种利用发夹引物进行多重PCR的方法和试剂盒、以及在建立二代测序平台文库中的应用。发夹引物3’端特异序列与目标区段完全配对,解链温度在80℃以上,在PCR反应时只在变性程序中打开发夹结构。可以有效减少非特异扩增和引物二聚体的形成,提高多重PCR产物的均一性。本发明还利用多重发夹引物进行两轮PCR反应快速方便地构建二代测序文库,并通过携带不同条形码序列的接头引物以区分不同模板,而不同的接头引物携带相同的通用扩增引物,以减少不同模板扩增产物的差异。