一种利用多重荧光竞争性PCR检测拷贝数变异的方法
基本信息
| 申请号 | CN201810059593.7 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN108103164B | 公开（公告）日 | 2022-01-11 |
| 申请公布号 | CN108103164B | 申请公布日 | 2022-01-11 |
| 分类号 | C12Q1/6858（2018.01）I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 肖君华;陈科 | 申请（专利权）人 | 上海翼和应用生物技术有限公司 |
| 代理机构 | 上海泰能知识产权代理事务所（普通合伙） | 代理人 | 谢文凯 |
| 地址 | 201620上海市松江区松江新城人民北路2999号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明利用多重荧光竞争性PCR对多个目标基因或位点进行拷贝数变异检测，以多重PCR取代人工合成或质粒构建进行内参文库构建。针对目标基因或位点和拷贝数确定的内参序列设计引物，区分序列以示区分，同时在特异引物的上下游5’端分别添加上下游通用序列。第一轮扩增构建文库后，将内参文库和检测文库混合，进行通用引物的第二轮扩增。利用检测文库和内参文库的目标基因或位点的荧光比值确定目标基因或位点的拷贝数。减少了竞争性PCR需要准确定量和稀释内参文库的过程，使多重荧光竞争性PCR替代了复杂的多重连接探针扩增。 |
