一种RSK4酶活性的快速检测方法及其应用
基本信息
| 申请号 | CN201910486214.7 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN110172495A | 公开（公告）日 | 2019-08-27 |
| 申请公布号 | CN110172495A | 申请公布日 | 2019-08-27 |
| 分类号 | C12Q1/48 | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 石榴;徐燕华 | 申请（专利权）人 | 武汉合研生物医药科技有限公司 |
| 代理机构 | 上海精晟知识产权代理有限公司 | 代理人 | 冯子玲 |
| 地址 | 430000 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新大道666号生物创新园B1栋二楼B274-12室 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明涉及一种RSK4酶活性的快速检测方法及其应用。检测方法为：(1)取待测样品、空白对照、阳性对照分别与RSK4酶、RSK多肽底物/ATP混合液共孵育进行激酶反应产生ADP；(2)向步骤(1)的三组激酶反应体系中分别添加ADP‑GloTM反应试剂共孵育，终止激酶反应并消耗完剩余ATP；(3)向步骤(2)的三组反应体系中分别添加激酶检测试剂共孵育，使ADP转化成ATP，并读取新合成的ATP的发光值RLU；(4)按酶活＝(RLU(Sample)‑RLU(Blank))/(RLU(Pos.Ctrl)‑RLU(Blank))×100％计算酶活。该方法基于ADP‑GloTM激酶实验，直接测定反应中消耗的ATP来定量反应的进程。该方法在普通实验室条件下操作，避免对操作人员和环境造成辐射伤害；且体系稳定，测定数据准确度高，可应用于RSK4靶点抑制剂的筛选和RSK4靶点抗肿瘤药物的筛选。 |
