一种TGFβR1（T204D）酶活性的快速检测方法及其应用专利查询专利号|摘要-满商公司网

一种TGFβR1（T204D）酶活性的快速检测方法及其应用

基本信息

申请号	CN201910485810.3	申请日	-
公开（公告）号	CN110196326A	公开（公告）日	2019-09-03
申请公布号	CN110196326A	申请公布日	2019-09-03
分类号	G01N33/573（2006.01）I	分类	测量；测试;
发明人	石榴; 徐燕华	申请（专利权）人	武汉合研生物医药科技有限公司
代理机构	上海精晟知识产权代理有限公司	代理人	冯子玲
地址	430000 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新大道666号生物创新园B1栋二楼B274-12室
法律状态	-

摘要

本发明属于生物化学技术领域，具体涉及一种TGFβR1(T204D)酶活性的快速检测方法及其应用。检测方法为：(1)取待测样品、空白对照品、阳性对照品分别与TGFβR1(T204D)酶、TGFβR1底物/ATP混合液共孵育进行激酶反应产生ADP；(2)向步骤(1)的三组激酶反应体系中分别添加ADP‑GloTM反应试剂共孵育，终止激酶反应并消耗完剩余ATP；(3)向步骤(2)的三组反应体系中分别添加激酶检测试剂共孵育，使ADP转化成ATP，并读取新合成的ATP的发光值RLU；(4)按酶活＝(RLU(Sample)‑RLU(Blank))/(RLU(Pos.Ctrl)‑RLU(Blank))×100％计算TGFβR1(T204D)酶活。该方法基于ADP‑GloTM激酶实验，直接测定反应中消耗的ATP来定量反应的进程。完成全部实验只需一天，大大缩短了检测时间。该方法可应用于TGFβR1(T204D)受体抑制剂和此靶点相关的抗肿瘤药物的筛选。