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一种突变酶SHP2 E76K的活性检测方法

基本信息

申请号	CN202011600458.2	申请日	-
公开（公告）号	CN113155787A	公开（公告）日	2021-07-23
申请公布号	CN113155787A	申请公布日	2021-07-23
分类号	G01N21/64;G01N1/38	分类	测量；测试;
发明人	石榴;徐燕华	申请（专利权）人	武汉合研生物医药科技有限公司
代理机构	上海精晟知识产权代理有限公司	代理人	张仁杰
地址	430000 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新大道666号生物创新园B1栋二楼B274-12室
法律状态	-

摘要

本发明公开了一种突变酶SHP2 E76K的活性检测方法，通过以下步骤，化合物配制添加，SHP2 E76K酶添加、底物添加、总体系反应和化合物本底读值检测，其中SHP2 E76K酶添加，用1X assay buffer将SHP2 E76K酶稀释到2ng/uL，取2uL每孔加入到对应孔中，化合物与酶在相应温度下进行预孵育，化合物预孵育的温度为20‑30度，且孵育时间为30‑90分钟，可以直接建立了SHP2蛋白突变型SHP2（E76K）的酶活检测方法，为药物在此靶点上的抑制作用检测提供了方法，直接检测化合物与酶的抑制作用，可快速筛选出有效果的化合物，快速推进药物的研发进度，本发明涉及SHP2 E76K活性检测技术领域。该突变酶SHP2 E76K的活性检测方法，解决现有技术中耗费大量时间及资金且细胞实验存在一些不稳定因素问题。