一种Nucyep的编码基因、重组表达载体、重组工程菌及其制备方法和应用
基本信息
申请号 | CN201811245986.3 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN109337887B | 公开(公告)日 | 2021-04-27 |
申请公布号 | CN109337887B | 申请公布日 | 2021-04-27 |
分类号 | C12N9/22;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/34 | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 葛燕;王辂;李端华;赵晨;李进军;刘涛 | 申请(专利权)人 | 中国医药集团总公司四川抗菌素工业研究所 |
代理机构 | 成都顶峰专利事务所(普通合伙) | 代理人 | 李林 |
地址 | 610000 四川省成都市外东十陵镇 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种Nucyep的编码基因、重组表达载体、重组工程菌及其制备方法和应用。该重组Nucyep的编码基因的核苷酸序列如SeqIDNo.2所示,或为与核苷酸序列如SEQIDNO.2所示的基因具有90%以上同源性的基因。将所述Nucyep的编码基因与pET‑24a(+)质粒重组构成重组表达载体,并将该重组表达载体转化入大肠杆菌Rosseta(DE3)构成重组工程菌。本发明所述重组工程菌的优点在于,优化了Nucyep的编码基因序列,使得该重组工程菌,在乳糖诱导下,仅需几个小时即可产生大量目的蛋白。表达产物为包涵体,避免了可溶性核酸酶对宿主菌的毒性作用。且本发明提供了Nucyep包涵体的复性和纯化方法,效率高,流程简单,易于操作,更加适用于Nucyep的工业生产和推广。 |
