一种用于检测EML4-ALK、ROS1和RET融合基因突变的方法
基本信息
申请号 | CN201810001999.X | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN108103175B | 公开(公告)日 | 2021-09-17 |
申请公布号 | CN108103175B | 申请公布日 | 2021-09-17 |
分类号 | C12Q1/6869;C12N15/11 | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 胡春旭;陆思嘉;任军 | 申请(专利权)人 | 序康医疗科技(苏州)有限公司 |
代理机构 | 北京品源专利代理有限公司 | 代理人 | 巩克栋 |
地址 | 215000 江苏省苏州市工业园区星湖街218号生物纳米园B7楼201单元 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明涉及生物技术领域,具体地涉及一种通过文库构建并测序一次性检测EML4‑ALK,ROS1和RET融合基因突变的方法。本发明能在3小时内,由1‑2000个新鲜组织细胞,10pg‑20ng经提取的总RNA,或血浆游离RNA为起始,在ALK,ROS1,RET特异性引物与逆转录酶的作用下对其中包含融合型信息的mRNA进行逆转录并获得cDNA第一链,而后以模板转换技术在cDNA的3’端添加一段接头序列(带有分子标签)并进行cDNA二链生成,而后以接头区段为引物锚定位点进行指数扩增的同时在cDNA两端加上Illumina文库接头,以获得符合下游分析要求的高质量cDNA文库。 |
