一种调控PCV2病毒增殖的序列及其应用
基本信息
| 申请号 | CN201910336909.7 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN110055251B | 公开（公告）日 | 2022-05-27 |
| 申请公布号 | CN110055251B | 申请公布日 | 2022-05-27 |
| 分类号 | C12N15/113（2010.01）I;C12N15/85（2006.01）I;C12N15/90（2006.01）I;A61P31/20（2006.01）I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 李俊;时建立;彭喆;吴晓燕;郑书轩;徐绍建;刘畅;韩红;王硕;孙盼盼;王妍 | 申请（专利权）人 | 山东省农业科学院畜牧兽医研究所 |
| 代理机构 | 济南泉城专利商标事务所 | 代理人 | - |
| 地址 | 250100山东省济南市历城区桑园路8号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明提供了一种调控PCV2病毒增殖的gRNAs序列。本发明设计了与PCV2复制相关的8个gRNA靶向片段：gRNA‑Oc8，gRNA‑O13，gRNA‑O134，gRNA‑O26，gRNA‑NPS，gRNA‑NQT和gRNA‑NAT，分别靶向PCV2复制起点的八聚体结构、ORF1和ORF3的重叠区、ORF1，ORF3和ORF4的重叠区、ORF2和ORF6的重叠区、ORF1的23‑25aa糖基化位点、ORF1的256‑258aa糖基化位点及ORF1的286‑288aa糖基化位点。以pX458为表达载体，获得PCV2 Cas9/gRNAs重组质粒，并对阳性Cas9/gRNAs克隆进行了测序鉴定。同时，成功得到以PCV2 Cas9/gRNAs重组质粒转染的PK‑15细胞系，且PCV2 Cas9/gRNAs重组质粒能对PCV2基因组进行有效编辑，并抑制PCV2在PK‑15细胞内的增殖复制。 |
