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一种由毕赤酵母表达串联蛋白的纯化工艺

基本信息

申请号 CN201811602069.6 申请日 -
公开（公告）号 CN111363025A 公开（公告）日 2020-07-03
申请公布号 CN111363025A 申请公布日 2020-07-03
分类号 C07K14/62;C12P21/06;C07K1/30;C07K1/16;C07K1/34;C07K1/36 分类 -
发明人 贾伟平;李校堃;程萍;倪晶 申请（专利权）人 上海新生源医药集团有限公司
代理机构 上海一平知识产权代理有限公司 代理人 徐林强;徐迅
地址 201203 上海市浦东新区中国（上海）自由贸易试验区蔡伦路780号208室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及一种由毕赤酵母表达串联蛋白的纯化工艺。具体地，本发明提供一种重组人胰岛素原C肽串联蛋白的纯化方法，包括步骤：(1)对发酵液进行离心，得到发酵离心上清液；(2)加入电解质进行盐析，得到沉淀蛋白；(3)加入复溶剂，得到沉淀蛋白复溶液；(4)沉淀蛋白复溶液经第一柱层析纯化；(5)加入胰蛋白酶和羧肽酶B进行双酶切，得到酶切液；(6)对所述的酶切液依次进行反相超滤和正相超滤，得到超滤液；(7)所述的超滤液经第二柱层析纯化；(8)进行正相超滤，得到重组人胰岛素原C肽原液。本发明所述方法能够制备高纯度和高收率的重组人胰岛素原C肽。