一种无CO2环境的MDCK细胞全悬浮无血清细胞系的制备方法

基本信息

申请号 CN201811331150.5 申请日 -
公开(公告)号 CN109609436A 公开(公告)日 2019-04-12
申请公布号 CN109609436A 申请公布日 2019-04-12
分类号 C12N5/071;C12R1/91 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 安芳兰;陶世宇;武发菊;田波;李菁;葛玉凤;柴立丽;董文教;程芳珍;刘强;丁小龙;刘学荣 申请(专利权)人 中农威特生物科技股份有限公司
代理机构 北京成实知识产权代理有限公司 代理人 中农威特生物科技股份有限公司
地址 730046 甘肃省兰州市城关区盐场堡徐家坪1号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种无CO2环境的MDCK细胞全悬浮无血清细胞系的制备方法,包括以下步骤:复苏MDCK细胞进行扩增培养;将获得的细胞进行无血清贴壁培养驯化;将获得的细胞悬液置于恒温振荡培养箱中使之从5%CO2环境逐步适应无CO2环境的全悬浮培养;利用正交试验L9(34)确定驯化成功的全悬浮培养细胞系的关键过程控制参数;将获得的过程参数对细胞进行直线逐级放大,建立该细胞系的(2L‑10L‑100L‑500L)规模化生产模型。MDCK细胞系密度及活力高、增值能力强,细胞形态良好,建立规模化生产模型不受CO2环境条件限制,填补MDCK细胞无CO2环境规模化悬浮培养的空白,可规模化直线放大,为MDCK细胞的规模化悬浮培养提供便捷的培养方式,为流感病毒疫苗等生物制品制备提供技术支持。