一种用于规模化悬浮培养的抗凋亡MDCK宿主细胞株及其建立方法

基本信息

申请号 CN201911157555.6 申请日 -
公开(公告)号 CN111117944A 公开(公告)日 2020-05-08
申请公布号 CN111117944A 申请公布日 2020-05-08
分类号 C12N5/071;C12N7/00;A61K39/145;A61P31/16;C12R1/93 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 武发菊;尚勇良;安芳兰;葛玉凤;陶世宇;刘强;张春祥;刘学荣;龙玉红 申请(专利权)人 中农威特生物科技股份有限公司
代理机构 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 代理人 中农威特生物科技股份有限公司
地址 730020 甘肃省兰州市兰州高新技术产业开发区南面滩268号(创新园创业大厦A座11层)
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种用于规模化悬浮培养的抗凋亡MDCK宿主细胞株及其建立方法。本发明采用基因重组技术将可调节细胞凋亡的基因Bcl‑2通过真核表达载体导入MDCK细胞,建立了Bcl‑2过表达的MDCK抗凋亡宿主细胞株,将改造的MDCK细胞株使用低血清培养基悬浮培养,72h时活细胞密度达4.5×106cel法律状态/ml,细胞活率95%以上,较正常组细胞表达量提高了31%;同时跟踪Bcl‑2基因过表达的MDCK细胞株培养过程中细胞凋亡和细胞周期情况,结果显示较正常组细胞,改造后的MDCK细胞的凋亡率显著降低,活力显著提高。本发明的提出为生产优质的疫苗产品提供了高质量的宿主细胞。