基于Cre重组酶诱导的大规模慢病毒基因药物制备系统及方法
基本信息
申请号 | CN202110157755.2 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN112852746A | 公开(公告)日 | 2021-05-28 |
申请公布号 | CN112852746A | 申请公布日 | 2021-05-28 |
分类号 | C12N15/66(2006.01)I;C12N15/52(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/866(2006.01)I;C07K14/47(2006.01)I;C12N15/867(2006.01)I;C12N7/01(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 董文吉;赵忠亮;陈志川;董祖伊;刘子瑾;程谟斌;张艳君 | 申请(专利权)人 | 中吉智药(南京)生物技术有限公司 |
代理机构 | 北京易捷胜知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人 | 齐胜杰 |
地址 | 211199江苏省南京市江北新区新锦湖路3-1号中丹生态生命科学产业园一期A座618室 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明涉及一种基于Cre重组酶诱导的大规模慢病毒基因药物制备系统,其包括:悬浮293稳转细胞株和表达Cre基因的病毒;所述悬浮293稳转细胞株的基因组上整合了慢病毒包装蛋白表达序列和目的基因序列;且所述慢病毒包装蛋白表达序列与驱动其表达的启动子之间插入loxP‑Stop‑loxP序列;loxP‑Stop‑loxP序列包含两个方向相同的loxP位点以及连接在两个loxP位点之间的Stop序列;所述表达Cre基因的病毒为可感染悬浮293细胞且能够表达Cre蛋白的病毒;所述表达Cre基因的病毒用于感染所述悬浮293稳转细胞株,激活慢病毒包装蛋白表达序列进行表达,以包装产生慢病毒。本发明其解决了质粒瞬时转染成本高,放大困难的问题;同时利用表达Cre基因的病毒感染进行诱导,避免四环素等抗生素诱导后难以去除的工艺难题。 |
