一种新型腺病毒包装方法在CRISPR/Cas9基因编辑方法中的应用
基本信息
| 申请号 | CN201910327804.5 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN110055278B | 公开（公告）日 | 2021-10-15 |
| 申请公布号 | CN110055278B | 申请公布日 | 2021-10-15 |
| 分类号 | C12N15/861（2006.01）I;C12N15/65（2006.01）I;C12N15/90（2006.01）I;C12N7/01（2006.01）I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 姬广聚;杨智广;顾磊;王会文;黄雪;黄海军;李静 | 申请（专利权）人 | 中科广聚（北京）生物医学技术中心有限公司 |
| 代理机构 | 北京悦和知识产权代理有限公司 | 代理人 | 田昕 |
| 地址 | 518000 广东省深圳市南山区粤海街道高新区社区科技南路16号深圳海科技生态园11栋A2901 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明实施例涉及生物技术领域，具体涉及一种新型腺病毒包装方法在CRISPR/Cas9基因编辑方法中的应用。本发明提供的腺病毒包装方法采用在体外进行连接的方法得到重组载体，避免了传统pAdEasy系统使用电转法使pAdEasy和穿梭质粒在细菌内发生同源重组的步骤，步骤简单，成功率高，且节省了腺病毒包装的时间，包装效率高，省时高效。本发明针对CRISPR/Cas9技术，设计了可用于新型腺病毒包装方法的pBlue‑DsRed‑Cas9和pBlue‑EGFP‑sgRNA等载体。对不同基因进行编辑时，只需改变pBlue‑EGFP‑sgRNA载体中sgRNA序列，pBlue‑DsRed‑Cas9载体可作为通用载体用于不同基因的编辑。本发明提供的新型腺病毒包装方法包装得到的腺病毒，用于CRISPR/Cas9技术，基因编辑效率高。 |
