一种sgRNA的体外合成方法及其试剂盒

基本信息

申请号 CN201810634615.8 申请日 -
公开(公告)号 CN108330138B 公开(公告)日 2018-09-25
申请公布号 CN108330138B 申请公布日 2018-09-25
分类号 C12N15/63;C12N15/10;C12N15/113;C12N9/22 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 朱化星;张清仪;石加加;赵曼曼;何翼 申请(专利权)人 上海欣百诺生物科技有限公司
代理机构 上海一平知识产权代理有限公司 代理人 王正君;徐迅
地址 201203 上海市浦东新区中国(上海)自由贸易试验区蔡伦路720弄2号楼304室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种sgRNA的体外合成方法及其试剂盒,具体地,本发明提供了具有5’‑3’的式I所示的结构的核酸构建物:Y1‑L1‑Y2‑L2‑Y3‑Y4 (I),其中,Y1为RNA聚合酶启动区;L1为无或连接序列;Y2为靶DNA序列;L2为无或连接序列;Y3为下游引物结合区;Y4为无或核苷酸序列;并且,各“‑”独立地为键或核苷酸连接序列。本发明的sgRNA合成体系可显著提高sgRNA的合成产量,并且可以将整个流程时间大幅缩短,步骤简便,平均费用也大大下降。