一种从土壤样本中高效扩增微生物DNA的方法

基本信息

申请号 CN202010566375.X 申请日 -
公开(公告)号 CN111733219A 公开(公告)日 2020-10-02
申请公布号 CN111733219A 申请公布日 2020-10-02
分类号 C12Q1/686(2018.01)I;C12Q1/6806(2018.01)I 分类 -
发明人 张慧;张鸿;赵琨;李西清 申请(专利权)人 安徽微分基因科技有限公司
代理机构 安徽申策知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 安徽微分基因科技有限公司
地址 238000安徽省巢湖市巢湖经济开发区龙泉路6号未名生物医药产业园一期南区C楼2层
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及分子生物学技术领域,且公开了一种从土壤样本中高效扩增微生物DNA的方法,包括以下步骤:步骤1、对土壤样本进行采集;步骤2、对采集的土壤样本进行微生物核酸提取;步骤3、对提取到的核酸进行质量检测;步骤4、原始PCR体系与优化后PCR体系扩增效果比对;步骤5、qPCR验证:扩增体系中最佳牛血清蛋白(BSA)添加浓度;本发明通过采集腐殖酸、有机物、重金属离子含量高等特殊土壤样本,采用Spin Kit for Soil试剂盒提取成功后,PCR扩增失败。通过优化PCR和qPCR体系,在PCR体系中添加牛血清蛋白(BSA)并摸索最佳浓度,使扩增成功率达100%,大幅度提升了PCR扩增效率。经验证在PCR体系中添加牛血清蛋白(BSA)对可正常扩增的土壤样本无影响。