一种人ATP7b基因外显子PCR扩增系统、检测试剂盒及其应用的方法
基本信息
| 申请号 | CN201810619125.0 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN108841929B | 公开（公告）日 | 2022-03-11 |
| 申请公布号 | CN108841929B | 申请公布日 | 2022-03-11 |
| 分类号 | C12Q1/6858（2018.01）I;C12Q1/6883（2018.01）I;CN 104830966 A,2015.08.12;CN 106011302 A,2016.10.12 杨华荣.肝豆状核变性的遗传学研究.《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》.2012,E070-46.;陈冬梅.Wilson病患儿ATP7B基因外显子突变研究.《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》.2010,E070-11.;Slavka Vrabelova等.Mutation analysis of the ATP7B gene and genotype/phenotype correlation in 227 patients with Wilson disease.《Molecular Genetics and Metabolism》.2005,第86卷（第2005期）,第277–285页. | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 彭朝敏;金云舟;周巍;陈林;李明阳;邓淑燕 | 申请（专利权）人 | 上海五色石医学研究股份有限公司 |
| 代理机构 | 上海上谷知识产权代理有限公司 | 代理人 | 蔡继清 |
| 地址 | 201407 上海市奉贤区沿钱公路5599号21942室 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明属于人核酸体外检测技术领域，具体为人ATP7b基因的PCR扩增检测系统及其应用。PCR扩增检测系统包括：引物组、PCR反应母液容器及Sanger Sequencing后的序列分析；引物组容器包含引物SEQ ID No.1～SEQ ID No.42贮存液。本发明在DNA提取情况后（DNA质量满足要求：1.6≤OD260/OD280≤2.0，DNA最低浓度≥10.0ng/μL），通过PCR反应对人ATP7b基因21个外显子目的片段同时扩增，通过目的片段的琼脂糖凝胶电泳进行ATP7b基因外显子有无缺失突变的判断，进而进行电泳凝胶DNA的回收纯化进行一代测序，通过测序片段的基因序列与Reference Sequence（权威数据库中参考序列）进行比对，最终进行目标序列中有无单碱基突变的判断，以期对人ATP7b基因全部外显子进行金标准方法探讨分析肝豆状核变性在分子遗传水平上的发病原因。而且，本方法操作简单，使用仪器设备普及度很高，适合推广使用。 |
