变形链球菌重组亚单位基因工程疫苗候选抗原Glu的纯化方法
基本信息
| 申请号 | CN201410082929.3 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN103820414B | 公开（公告）日 | 2016-08-17 |
| 申请公布号 | CN103820414B | 申请公布日 | 2016-08-17 |
| 分类号 | C12N9/10(2006.01)I;C12R1/46(2006.01)N;C12R1/19(2006.01)N | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 张卫军;刘开云;付强;邹全明;郭刚;张怡;孙红武;付启欢;樊绍文;卢陆;高莺 | 申请（专利权）人 | 重庆原伦生物科技有限公司 |
| 代理机构 | 重庆志合专利事务所 | 代理人 | 胡荣珲 |
| 地址 | 611731 四川省成都市高新区天欣路99号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明提供一种变形链球菌重组亚单位基因工程获选疫苗抗原Glu的纯化方法，包含步骤：收集发酵的变形链球菌重组亚单位基因工程疫苗Glu蛋白的大肠杆菌菌体，采用高压匀浆破菌，收集上清，离心上清，收集沉淀；包涵体洗涤；包涵体裂解：用含尿素的PBS缓冲液重悬，离心，弃沉淀，保存上清；初步复性：取含尿素的PB缓冲液，将包涵体溶解液逐滴缓慢加入到上述搅拌的缓冲液中，离心，弃沉淀，上清上柱纯化；亲和层析纯化：在含尿素的PB缓冲液条件下对目的蛋白进行纯化，目的蛋白与填料结合后，用含氟化钠的PB缓冲液进行酶切洗脱，收集洗脱液即为层析纯化的Glu蛋白。采用本发明的方法纯化的抗原纯度高，工艺简捷。 |
